Fundamento: Microorganismos como levaduras, hongos filamentosos, Micobacterias o Nocardias tienen pared celular muy gruesa. Es necesario romper pared y liberar las proteínas para el análisis del espectro 블랙호크다운 다운로드. Siempre hay que usar reactivos químicos de alta pureza para la calidad de la extracción y del espectro.
Materiales necesarios:
- Eppendorf de 1,5mL
- Pipetas y tips
- Microcentrifuga
- Cabezales para eppendorf
- Escarbadientes
- Vortex
- HCCA
- BTS
- Placa Maldi
- Agua pura
- Etanol 100%
- Acido fórmico (AF) 70%
- Acetonitrilo (AN) 100%
- Microorganismos frescos: cultivo overnight 안드로이드 펌웨어. Algunos microorganismos de crecimiento lento necesitan más días de cultivo antes de testearlos. No utilizar cultivos que hayan sido almacenados a 4°C o temperaturas más bajas peak 웹툰 다운로드. Esto puede alterar el espectro y su reproducibilidad.
Procedimiento:
- Agregar 300uL de agua en cada tubo eppendorf
- Transferir varias colonias aisladas al tubo Download Xinjiang's ambition innovations. Vortexear vigorosamente
- Agregar 900uL de Etanol. Vortexear vigorosamente
- Centrifugar al máximo por 2 minutos
- Decantar el EtOH Download WebLogic 12c. Centrifugar por 2 minutos
- Remover todo el exceso de EtOH con pipeta ( no deben quedar rastros de EtOH. Los tubos tienen que permanecer a temperatura ambiente para completar evaporación)
- Agregar 50uL de ácido fórmico (si la cantidad de microorganism es poca, bajar el volume de AF a 10uL) 모방범 다운로드. Vortexear vigorosamente
- Agregar 50uL de acetonitrilo (si la cantidad de microorganism es poca, bajar el volume de AN a 10uL). Vortexear vigorosamente 익스플로러10 파일. Note que el 70% de AF y el 100% de AN deben estar en volúmenes idénticos
- Centrifugar al máximo por 2 minutos
- Pipetear 1uL del sobrenadante en un pocillo de la placa Download the march for the. Evitar tocar el pellet en el fondo. Dejar secar
- Cubrir con 1uL de HCCA. Dejar secar. Chequear que la placa esté completamente seca antes de introducirla en el Maldi Biotyper