Introducción: El MALDI Biotyper utiliza varias soluciones de ácidos orgánicos. Para:
- Preparar el Standard bacteriano (BTS) y la matriz (HCCA)
- Completar el proceso de extracción en ácido fórmico
- Limpiar la placa reutilizable
Materiales:
- Campana para trabajar con reactivos químicos
- 100% Etanol (HPLC/MS Grade)
- 100% ácido fórmico (HPLC/MS Grade)
- 100% Acetonitrilo (HPLC/MS Grade)
- 100% ácido trifluoroacético (HPLC/MS Grade)
- Agua pura (HPLC/MS Grade)
- Guantes
- Tubos eppendorf de 1,5 mL
- Tips y pipetas
- Recipientes de vidrio para almacenar reactivos
- Botellas de plástico ( para 70% EtOH y agua)
- Bottle Opener para destapar reactivos químicos
NOTA: El ácido trifluoroacético (TFA) es muy corrosivo; Acetonitrilo (AN) es altamente inflamable Download old town road.
NOTA: Nunca utilizar las botellas primarias para preparar muestras
Preparación del solvente orgánico: Debe ser preparado bajo campana química y utilizar guantes de protección emmet 다운로드. Se utiliza para reconstituir el standard bacteriano (BTS) y la matriz (HCCA); Guardar a temperatura ambiente. Tener en cuenta que el Acetonitrilo es muy volátil y su evaporación puede impactar negativamente sobre la concentración del solvente Download the product manual. Siempre hay que agregar primero agua en la botella y luego agregar TFA y AN.
Para preparar 1mL de solvente orgánico en un eppendorf de 1.5mL:
475uL de agua + 25uL 100% TFA + 500uL de 100% AN = 1mL de solvente orgánico (SO)
Preparación de soluciones para extracción con ácido fórmico (AF): El procedimiento de extracción con AF se usa para romper paredes celulares para que las proteínas puedan liberarse, lo que es necesario para obtener el espectro Al ftp. Se necesitan 4 soluciones/solventes
- 70% ácido fórmico: 300uL agua + 700uL 100% ácido fórmico = 1mL 70% ácido fórmico
- 100% Acetonitrilo: traspasar aproximadamente 5mL de AN en un recipiente de seguridad Download web square. OJO con la evaporación
- 100% Etanol: traspasar aproximadamente 50mL de EtOH a una botella de vidrio o recipiente de plástico de alta calidad
- Agua pura: traspasar aproximadamente 50mL de agua a una botella de vidrio o recipiente de plástico de alta calidad 곰녹음기 무료 다운로드. Guardar a tempratura ambiente. Reemplazar inmediatamente si el agua aparece turbia
Limpieza de placa: Una vez que la placa se completa ( se ocuparon todos los pocillos con muestras), es necesario limpiarla con 70% Etanol y 80% de ácido trifluoroacético commission.
Para preparar 100mL de 70% EtOH, preparar en botella de plástico y almacenar a temperatura ambiente
30mL de agua + 70 mL de 100% de EtOH = 100mL de 70% EtOH
Para preparar 1mL de 80% de ácido trifluoroacético:
200uL de agua pura + 800uL de 100%TFA= 1mL de 80% TFA